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대한생식의학회지 제31권 제1호 2010년
배양액 용량이 마우스 2-세포기 배의 배반포 형성, 세포수 및내세포괴 비율에 미치는 영향
제주대학교 의과대학 산부인과, 경북대학교 의과대학 산부인과
김성엽, 박기상
Effects of Media Volume on Blastocyst Formation, Cell Numbersand ICM Proportion in Mouse Two-cell Embryos
Sung Yob Kim,Kee Sang Park
Department of OB/Gyn, School of Medicine, Cheju National University and Department of OB/Gyn, Kyungpook National University Hospital
연구 목적: 본 연구의 목적은 마우스에서 배양액의 용량이 배반포 배 형성과 세포수에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였다. 연구 재료 및 방법: 3~4주령 ICR 암마우스에게 48시간 간격으로 5 IU PMSG와 hCG 주사 후 (hCG 주사 후 수컷과 동숙) 46~50시간에 난관으로부터 총 138개의 2-세포기 배를 회수하여 2 ml (group I) 또는 50 µl (group II)의 배양액 (Dulbecco's Modified Eagle Medium+20% human follicular fluid)에서 72시간 동안 배반포기까지 배양하였다. 배반포 배는 zona-intact (ZiB)와 zona-escape (ZeB)로 등급을 구분하고 나서, propidium iodide와 bisbenzimide를 이용한 differential staining 방법으로 염색하여 평균 세포수, 내세포괴 (ICM) 세포수, 영양배엽 (TE) 세포수, 총 세포수에 대한 ICM의 비율 (%ICM) 및 ICM:TE 비율을 조사하였다. 결과에 대한 유의성 검정은 χ2 test와 t-test를 이용하였으며, p<0.05일 때 통계적인 차이가 있는 것으로 하였다. 결 과: Group I과 II에서, 총 배반포 (62.3±20.7% vs. 63.8±22.9%), ZiB (31.9±24.0% vs. 30.4±18.2%)와 ZeB 형성율 (30.4±20.8% vs. 33.3±22.3%)은 차이가 없었다. 87개의 배반포 배를 염색 시도하였는데, 명확하게 differential staining된 41개의 배반포 배만을 대상으로 세포수를 조사하였다. 평균 세포수 (61.6±19.5 vs. 63.7±26.8), ICM 세포수 (13.0±10.6 vs. 12.8±10.5), TE 세포수 (49.0±19.0 vs. 47.8±18.7), %ICM (21.0±12.6% vs. 21.1±13.2%) 및 ICM:TE 비율 (1:3.77±4.9 vs. 1:3.72±4.8)에서도 group I과 II에서 차이가 없었다. 결 론: 마우스에서 배 발생 능력의 척도로 쓰이는 배반포 배 형성율, 배반포 배의 등급, 세포수 및 %ICM 등이 20% 난포액을 첨가한 MEM 배양액의 용량에 따라 영향을 받지 않았다.
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키워드 : Media volume, Mouse blastocyst, Mean cell number, ICM and TE cell number, ICM proportion
교신저자 : keespark@yahoo.com
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